# Desarrollan un método para una detección ágil del virus de la lengua azul > Mediante genética reversa, han generado virus de lengua azul recombinantes replicativos que expresan una proteína fluorescente o luminiscente y que permite rastrear la infección a través de técnicas de imagen --- Consulta la previsión del tiempo en tu localización exactaSuscríbete a nuestra Newsletter semanal [Home](http://localhost:8080/)/[Innovación](http://localhost:8080/innovacion)/Tecnología 12 March 2024 4 min # Desarrollan un método para una detección ágil del virus de la lengua azul Mediante genética reversa, han generado virus de lengua azul recombinantes replicativos que expresan una proteína fluorescente o luminiscente y que permite rastrear la infección a través de técnicas de imagen Sanidad Animal ![Vacunación frente a la lengua azul. Imagen: EFE Agro.](https://static.plataformatierra.es/strapi-uploads/assets/web_virus_lengua_azul_EFE_AGRO_2_8d4f70e78f.jpg) Guardar Compartir --- [**La lengua azul**](https://www.mapa.gob.es/es/ganaderia/temas/sanidad-animal-higiene-ganadera/sanidad-animal/enfermedades/lengua-azul/lengua_azul.aspx) **es una enfermedad viral infecciosa que afecta a los rumiantes, provocada por un arbovirus (familia** _**Sedoreoviridae**_**, género** _**Orbivirus**_**), que se transmite mediante la picadura de mosquitos del género** _**Culicoides**_ **infectados por el virus. Muchas especies de virus del género Orbivirus causan enfermedades graves en mamíferos.**  Sin embargo, tres arbovirus transmitidos por _Culicoides_ han atraído más atención debido a su considerable impacto, no sólo sobre la salud de los animales, sino porque suponen graves pérdidas económicas para los ganaderos y son de notificación obligatoria: **el virus de la lengua azul (BTV), el virus de la peste equina africana (AHSV) y el virus de la enfermedad hemorrágica epizoótica (EHDV)**.  En el año 2023 se han notificado nuevos brotes de lengua azul de serotipo 3 y 8 en Europa, además de los casos de serotipo 4 en la península ibérica y recientemente se han notificado por primera vez en Europa brotes de EHDV-8, virus frente al que no se dispone de una vacuna licenciada en Europa. Un equipo coliderado por **los doctores Javier Ortego y Aitor Nogales** en el [**Centro de Investigación en Sanidad Animal (CISA) del INIA-CSIC**](https://www.inia.es/unidades/Institutos%20y%20Centros/CISA/Pages/Home.aspx) ha generado el virus de la lengua azul recombinantes (rBTV) que expresan proteínas fluorescentes o luminiscentes que permiten rastrear la infección por BTV tanto en cultivos celulares como en infecciones experimentales en animales.  > El uso de estos virus con capacidad de replicación que expresan una proteína fluorescente o bioluminiscente ha contribuido significativamente al estudio _in vitro_ e _in vivo_ de infecciones virales y al desarrollo de nuevos enfoques terapéuticos “_A pesar de la disponibilidad de vacunas, el BTV y otros orbivirus relacionados, todavía tienen un impacto significativo en la salud animal, y tienen importantes consecuencias económicas en todo el mundo. Estos estudios contribuirán al avance de la investigación sobre orbivirus y a facilitar el rápido desarrollo de nuevos tratamientos, incluidas vacunas, frente a estos virus_”, explica Javier Ortego. Mediante genética reversa, los investigadores han diseñado y rescatado rBTVs de los serotipos 1, 4 y 8 que expresan la proteína **NanoLuc luciferasa (NLuc)** o la proteína fluorescente Venus. “_Eso significa que la señal fluorescente o luminiscente sólo se detecta si se produce replicación del virus y se expresan las proteínas no estructurales_”, aclara Ortego. La cinética de crecimiento de los virus rBTV/NLuc y rBTV/Venus en cultivos celulares mostró tasas de replicación similares a las del virus silvestre. Los estudios de infectividad de estos virus recombinantes en modelos de ratones sensibles a la infección por orbivirus mostraron que los virus que expresan los genes indicadores están atenuados _in vivo_.  ![Cultivo de células Vero infectadas con virus recombinante de la lengua azul que expresa la proteína verde fluorescente Venus. Núcleos teñidos con DAPI (azul). Proteína NS1 marcada en rojo](https://static.plataformatierra.es/strapi-uploads/assets/web_Celulas_infectadas_BTV_d22c99e939.png) __Cultivo de células Vero infectadas con virus recombinante de la lengua azul, que expresa la proteína verde fluorescente Venus. Núcleos teñidos con DAPI (azul). Proteína NS1 marcada en rojo. Imagen: INIA-CSIC.__ Curiosamente, se detectó actividad luciferasa en el plasma de ratones virémicos infectados con rBTV/NLuc, estando la señal luminiscente relacionada cuantitativamente con los niveles de ARN viral en la sangre de los ratones infectados durante toda la infección. Esta característica permitió utilizar rBTV-8/NLuc para estudiar la eficacia de una vacuna comercial frente a BTV-8. El análisis de la replicación viral mediante RT-qPCR u otros ensayos convencionales es laborioso y caro, o como en el caso del aislamiento del virus, suele llevar días.  [![Banner Newsletter Cajamar AND Agro ](https://static.plataformatierra.es/strapi-uploads/assets/banner_newsletter_2023_9107d200f3.png)](https://hola.plataformatierra.es/suscripcion-newsletter?utm_source=banner+&utm_medium=innovacion&utm_campaign=nl1) “_La posibilidad de cuantificar la bioluminiscencia directamente a partir de muestras de sangre y poderla correlacionar con los niveles de viremia de los animales evita pasos de manipulación de las muestras que requieren mucho tiempo. Esto permite una determinación rápida y precisa de la presencia del virus en sangre, lo que facilita la evaluación de la eficacia y potencia de nuevas vacunas frente al virus de la lengua azul_”, añade Aitor Nogales. Por último, estos virus recombinantes que expresan la luciferasa NLuc han permitido por primera vez **estudiar la dinámica de la infección viral en el mismo animal** durante la progresión natural de la misma, utilizando sistemas de imágenes _in vivo_ no invasivos (tecnología IVIS).  “_Los estudios descritos en este trabajo serán de gran utilidad para evaluar la patogenicidad de estos orbivirus de gran relevancia en sanidad animal y contribuirán al desarrollo de novedosas alternativas terapéuticas, como nuevas vacunas o antivirales_”, concluye Javier Ortego. **Referencia bibliográfica**: Sergio Utrilla-Trigo, Luis Jiménez-Cabello, Alejandro Marín-López, Miguel Illescas-Amo, Germán Andrés, Eva Calvo-Pinilla, Gema Lorenzo, Piet A. van Rijn, Javier Ortego, Aitor Nogales (2024). Engineering recombinant replication-competent bluetongue viruses expressing reporter genes for in vitro and non-invasive in vivo studies. DOI: 10.1128/spectrum.02493-23 [License![Licencia Creative Commons Atribución 4.0 Internacional. Se permite la reproducción total o parcial del contenido siempre que se cite la fuente original.](https://i.creativecommons.org/l/by/4.0/88x31.png)](https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/) Esta obra está bajo una [Licencia Creative Commons Atribución 4.0 Internacional. Se permite la reproducción total o parcial del contenido siempre que se cite la fuente original.](https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/) --- Guardar Compartir --- --- Source: http://localhost:8080/innovacion/desarrollan-metodo-deteccion-agil-virus-lengua-azul